Е.Ф.Васильева, Г.И.Коляскина, С.Г.Кушнер, В.Г.Каледа,
М.Я.Цуцульковская,
г. Москва, Россия
ВСТУПЛЕНИЕ.
В настоящее время на основании большого количества данных установлено, что
между центральной нервной системой (ЦНС) и иммунной системой существует тесная
взаимосвязь (1). Гормоны мозга, как теперь известно, стимулируют регуляторные
процессы в иммунной системе. Подобно этому, медиаторы иммунной системы могут
регулировать функции ЦНС. В последнее время в многочисленных исследованиях было
изучено состояние иммунной системы при ряде психических заболеваний. У больных
шизофренией были обнаружены иммунологические расстройства, в число которых входило
изменение количества циркулирующих Т-клеток и их субпопуляций (2,3,6, 8), нарушение
пролиферации стимулированных митогеном лимфоцитов (3,6), увеличение количества
В-лимфоцитов и специфических противомозговых и антитимических антител (6). Результаты
этих исследований свидетельствуют о том, что при шизофрении имеет место нарушение
иммунных функций. Причины и механизмы изменений иммунной системы пока не известны.
Одним из путей решения этой проблемы является оценка функциональной активности
клеток, которые могут участвовать в развитии иммунного ответа.
Лимфоциты натуральные киллеры (НК) представляют собой отдельную субпопуляцию
лимфоцитов, которые способны убивать опухолевые клетки без предварительной сенсибилизации.
Известно, что НК клетки играют важную роль в элиминации ин виво спонтанно растущей
опухоли и в защите организма от заболеваний вирусной и микробной этиологии.
Кроме того, установлено, что НК клетки осуществляют иммунологический надзор
в организме (4). В связи с этим целью наших исследований было изучение количества
и цитотоксической активности (ЦА) НК клеток у больных шизофренией (ШЗ) и шизоаффективным
психозом (ШАП).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
Было обследовано две группы больных: 31 больной ШЗ (12 - непрерывнотекущей
параноидной формой и 19 приступообразно-прогредиентной формой) и 20 больных
ШАП. Больные были классифицированы в соответствии с международной класификацией
болезней - МКБ-10 (ШЗ - F 20.00 и F 20.01 и ШАП - F 25). Все обследованные были
мужчины в возрасте 18-55 лет. Обследование больных проводили дважды: до начала
курсового лечения психотропными препаратами и после его завершения. Контрольная
группа включала 11 здоровых мужчин, соответствующих по возрасту больным. При
анализе полученных данных учитывали следующие факторы: возраст больного в начале
заболевания и на момент обследования, длительность заболевания, соотношение
больных с низким и высоким уровнем ЦА и количеством НК.
Лимфоциты выделяли из периферической венозной крови в градиенте плотности
фиколл-верографина. ЦА НК лимфоцитов оценивали по количеству недеградированной
3Н-РНК, которая остается в клетках мишенях (К-562) после контакта
с НК клетками. Для постановки мембраноцитотоксического теста лимфоциты (2х105)
культивировали с клетками мишенями (104), меченными 3Н-уридином
в обогащенной среде RPMI-1640 с 5% эмбриональной телячьей сыворотки, глутамином
(10 мкг/мл), гентамицином (10мкг/мл) и хепесом (1 мМ) в 96 луночных круглодонных
панелях в течение 14-16 часов при температуре 370С во влажной атмосфере
с 5% СО2.. Соотношение эффектор-мишень в каждой ячейке составляло
20:1. В контрольных ячейках находились только меченные клетки мишени. Радиоактивность
мишеней (cpm) оценивали на жидкостном сцинцилляционном b-счетчике.
Результаты выражали с помощью индекса цитотоксичности (ИЦ).
Относительное количество НК клеток определяли с помощью флуоресцеин-конъюгированных
моноклональных антител CD-16 как процент от общего количества лимфоцитов.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием t-критерия
Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Изучение ЦА НК в группах больных ШЗ и ШАП до начала лечения позволило выявить
существенное снижение этого показателя у больных параноидной и приступообразно-прогредиентной
ШЗ по сравнению с контролем (Р<0,01). Уровень ЦА НК лимфоцитов
в группе больных ШАП достоверно не отличался от такового в контрольной группе
здоровых (табл.1). Следует отметить, что количество НК клеток во всех обследованных
группах больных до лечения не отличалось существенно от контроля (табл.1).
Таблица 1. Цитотоксическая активность и количество лимфоцитов натуральных
киллеров у больных до лечения и в контроле.
|
ГРУППЫ
|
Цитотоксическая активность
лимфоцитов натуральных
киллеров
|
Количество лимфоцитов
натуральных киллеров
|
|
Кол-во больных
|
Индекс цитотоксичности (ИЦ,%)
|
Кол-во больных
|
Количество светящихся клеток, %
|
|
ШИЗОФРЕНИЯ
|
|
Параноидная
|
9
|
22,1±7,6
*
|
8
|
27,7±5,3
|
|
Приступообразно-прогредиентная
|
15
|
29,9±4,8
*
|
11
|
28,0±4,8
|
|
ШИЗОАФФЕКТИВНЫЙ ПСИХОЗ
|
15
|
37,1±6,0
|
12
|
17,5±3,2
|
|
КОНТРОЛЬ
|
11
|
50,5±5,4
|
10
|
22,5±1,0
|
Примечание: * - Р < 0,01 по сравнению с контролем.
Более детальный анализ цитотоксической активности
и количества НК лимфоцитов, проведенный у больных ШЗ и ШАП в зависимости от
возраста начала заболевания и возраста на момент обследования (до 30 лет и 30
и более лет), не выявил существенных различий между этими подгруппами больных
ни по одному из исследуемых показателей.
Сопоставление ЦА и количества НК лимфоцитов у одних
и тех же больных до и после лечения психотропными препаратами не выявило существенных
отличий в значении этих иммунологических показателей во всех обследованных группах
больных (рис.1).
Рис.1. Цитотоксическая активность (А) и количество
(Б) лимфоцитов натуральных киллеров в группах больных до и после лечения.
Здесь и на рис. 2 незаштрихованные столбики - значение
показателя до лечения; заштрихованные столбики - то же после лечения.
1 - Параноидная ШЗ; 2 - Приступообразно-прогредиентная
ШЗ; 3 - Шизоаффективный психоз.
Вместе с тем анализ полученных
данных, проведенный после разделения больных на подгруппы в зависимости от уровня
ЦА НК до лечения (низкий и высокий уровни показателей по отношению к средним
значениям в группах), показал, что при низком уровне ЦА НК клеток выявляется
тенденция к его повышению после лечения при всех формах заболеваний (рис.2).
При этом, наоборот, в подгруппах больных с высоким уровнем показателя выявлялась
тенденция к его снижению после лечения.
Рис.2. Изменение уровня цитотоксической активности лимфоцитов натуральных
киллеров после лечения у больных с низким уровнем активности до лечения.
Здесь обозначения те же, что и на рис.1.
Дальнейший анализ распределения больных в соответствии с низким и высоким
уровнем ЦА НК лимфоцитов до лечения выявил в группах больных параноидной и приступообразно-прогредиентной
ШЗ до лечения большой процент лиц с низким уровнем показателя и лишь небольшую
часть лиц с высоким уровнем ЦА НК клеток. Напротив, у большинства больных ШАП
до лечения обнаружен высокий уровень ЦА НК (рис.3).
Рис. 3. Соотношение лиц с низким и высоким уровнем цитотоксической активности
лимфоцитов натуральных киллеров у больных шизофренией и шизоаффективным психозом
до лечения.
Аналогичная картина выявлялась при обследовании этих больных после лечения
психотропными препаратами.
Анализ клинико-иммунологических корреляций, проведенный с учетом длительности
болезни, показал, что у больных параноидной ШЗ с длительностью болезни 10 и
более лет уровень ЦА НК клеток до лечения был значительно ниже, чем в контроле
(Р<0,05) и оставался таким же после лечения. При этом необходимо
отметить, что процент больных с низким уровнем ЦА НК при параноидной ШЗ с длительностью
болезни 10 и более лет возрастал после лечения. Соответственно этому процент
лиц с высоким уровнем ЦА НК у этих же больных уменьшался. При этом у них наблюдалось
повышение пропорции больных с высоким количеством НК клеток (рис.4).
А
Б
Рис.4. Соотношение больных с низким и высоким уровнем цитотоксической активности
(А) и количеством (Б) лимфоцитов натуральных киллеров у больных параноидной
шизофренией с длительностью болезни 10 и более лет до и после лечения.
Аналогичный анализ данных, проведенный у больных приступообразно-прогредиентной
ШЗ показал, что уровень ЦА НК лимфоцитов у пациентов с длительностью болезни
менее 10 лет до лечения не отличался от такового в общей группе больных этой
формой ШЗ и после лечения оставался таким же. У больных же с длительностью болезни
10 и более лет значение этого показателя до лечения было выше, чем в общей группе
больных, а после лечения значительно снижалось (Р<0,05, рис.5,
А). При этом и соотношение лиц с низким и высоким уровнем ЦА НК существенно
смещалось в сторону увеличения больных с низким уровнем показателя (рис.5, Б).
А
Б
Рис.5. Изменение цитотоксической активности (А) и соотношения лиц с низким
и высоким уровней цитотоксической активности (Б) лимфоцитов натуральных киллеров
у больных приступообразно-прогредиентной шизофренией с длительностью болезни
10 и более лет.
ОБСУЖДЕНИЕ
Таким образом, результаты проведенных исследований выявили снижение уровня
ЦА НК при параноидной и приступообразно-прогредиентной формах ШЗ по сравнению
с контролем. У больных ШАП уровень ЦА НК лимфоцитов не отличался статистически
достоверно от такового в контрольной группе здоровых. Количество НК лимфоцитов
в общих группах обследованных больных существенно не отличалось от контрольных
цифр. Эти данные могут свидетельствовать о существовании патогенетических и,
возможно, нозологических различий между двумя разновидностями эндогенного психоза.
Кроме того, полученные результаты, а также дополнительные данные, выявившие
до лечения при параноидной ШЗ с большой длительностью заболевания большой процент
лиц с низким уровнем ЦА НК и увеличение этой пропорции после лечения, а также
повышение у этих больных после лечения пропорции лиц с высоким количеством НК
клеток, позволяют предположить, что часть НК клеток в этих случаях является
незрелой, недифференцированной и не способной к цитотоксической активности.
Помимо этого, так как НК клетки активизируются различными лимфокинами, такими,
как ИФ и ИЛ-2, снижение ЦА НК лимфоцитов у этих больных может быть отражением
изменений активности этих субстанций при различных формах ШЗ (5,6). Вместе с
тем, необходимо принимать во внимание возможность иммуномодулирующего действия
психотропных препаратов, которые, как известно, при длительном применении в
высоких дозах вызывают широкий спектр изменений в иммунной системе больных.
Возможно, что эти изменения не нормализуются после того, как больные перестают
принимать нейролептики.
Подтверждением этому в некоторой степени могут служить полученные нами результаты,
выявившие при параноидной и приступообразно-прогредиентной ШЗ с большой длительностью
заболевания повышение после лечения пропорции лиц с низким уровнем ЦА НК и,
наоборот, снижение процента больных с высоким уровнем показателя. В этих случаях
необходимо учитывать отсроченные эффекты нейролептиков, которые могут проявиться
через длительное время после прекращения приема лекарств.
Представленные нами результаты можно считать предварительными. Для получения
более полной информации о состоянии системы НК лимфоцитов у больных эндогенными
психозами необходимо проведение расширенных исследований с изучением роли цитокинов
и психотропных препаратов в изменении цитотоксичности и количества НК лимфоцитов
при этой патологии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ader R. 1981. Psychoneuroimmunology. Academic Press,
N.Y.
2. DeLisi L.E., Wyatt R.J. 1982. Psychopharmacology
Bull., 18:158-163.
3. Ganguli R. et al. 1987. In: Viruses, Immunity and Mental
Disorders (E.Kurstak, Z.Lipowski, P.Morozov, eds). Plenum Med.Book Company,
N.Y., London, pp.321-326.
4. Herberman R.B., Ortaldo J.R. 1981.
Science, 214:24-30.
5. Katila H. et al. 1989. Schiz. Res.,
2:361-365.
6. Kolyaskina G. et al. 1991. In: Psychiatry
and Biological Factors (E.Kurstak, ed.). Plenum Med. Book Company, N.Y., London,
pp.169-180.
7. . Vartanian M., Kolyaskina G. 1987. Ann.
N.Y. Acad.Sci., 469:660-668
8. Vartanian M. et al. 1978. In: Neurochemical and Immunological
Components in Schizophrenia (D.Bergsma, A.L.Goldstein, eds.). Alan R.Liss, N.Y.,
p.339-364.
